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EGFR D770_N771insSVD/BaF3

CBP73175

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I. Background

      EGFR(Epidermal Growth Factor Receptor)是上皮生長因子(EGF)細胞增殖和信號 傳導的受體,EGFR 是一種糖蛋白,屬于酪氨酸激酶型受體,位于細胞膜表面,靠與配體 結合來激活。EGFR 與腫瘤細胞的增殖、血管生成、腫瘤侵襲、轉移及細胞凋亡的抑制有 關。EGFR 基因突變是預測 NSCLC 患者使用 EGFR-TKIs 療效的重要靶標。

      EGFR 酪氨酸激酶區(qū)域的突變主要發(fā)生在 18-21 外顯子,其中 19 號和 21 號外顯子突 變覆蓋突變的 90%。EGFR 突變主要包括 4 種類型:外顯子 19 缺失突變、外顯子 21 點突 變、外顯子 18 點突變和外顯子 20 插入突變。最常見的 EGFR 突變?yōu)橥怙@子 19 缺失突變 和外顯子 21 點突變,二者均會導致酪氨酸激酶結構域活化。EGFR 基因突變可以分為兩大 類,一個是藥物敏感突變,也就是突變后可以使用某種靶向藥物(如 19 缺失,L858R 突 變),另一個是耐藥突變,即突變后對某種靶向藥物耐藥(如 T790M 突變)。

 
II. Background

      BaF3(小鼠原 B 細胞)的生長和增殖需要 IL-3 的維持。通過引入各種表達激酶的基因, 能作為 BaF3 的驅動基因,讓 BaF3 不再依賴 IL-3 而增殖,進而激酶基因成為 BaF3 增殖依 賴的驅動基因,用于評估小分子藥物對激酶的靶向抑制作用,原理及流程見下圖所示。
 



Figure 1. 
EGFR[D770_N771insSVD] BaF3 細胞的構建原理圖

 
III. Introduction
Cell Line Name: EGFR D770_N771insSVD/BaF3
Host Cell: Ba/F3
Stability: 32 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.)
Application: Useful for the study of enzyme kinetics, screening inhibitors, and selectivity profiling.
Freeze Medium: 90% FBS+10% DMSO
Complete Culture Medium: RPMI-1640+10%FBS
Mycoplasma Status: Negative
 
IV. Representative Data

1.WB of EGFR D770_N771insSVD/BaF3



Figure 2. 
WB of EGFR D770_N771insSVD/BaF3
 

2.Sanger of EGFR D770_N771insSVD/BaF3



Figure 3. 
Sanger of EGFR D770_N771insSVD/BaF3

 

3. Anti-proliferation assay

Figure 4. CTG Proliferation Assay of  EGFR [D770_N771insSVD] BaF3(C2).


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